LFB 髓鞘染色法 |
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实验方法原理 | 劳克坚牢蓝(LuxolFastBlue,LFB)属于铜-酞箐染料,在酒精溶液中具有与髓鞘磷脂结合的染色特性。应用LFB髓鞘染色可以很好地显示出神经组织的髓鞘结构。 |
实验材料 | 髓鞘 |
试剂、试剂盒 | LFB溶液 0.05%碳酸锂溶液 0.25%焦油紫溶液 |
仪器、耗材 | 滤器 |
实验步骤 | 1、切片经蒸馏水清洗后,入0.1% LFB溶液,于60℃密封浸染8-16h。 |
2、经蒸馏水清洗后,入95%酒精。 |
3、以0.05%碳酸锂水溶液分色10s以上。 |
4、经70%酒精继续分色,直至显微镜下观察灰、白质区分清晰为止。 |
5、 蒸馏水洗片后,用0.25%焦油紫溶液加数滴冰醋酸染液复染10min。 |
6、70%酒精将复染颜色分至细胞核及尼氏体呈红色。 |
(8)二甲苯透明,中性树胶封片。髓鞘呈鲜蓝色,核呈深蓝色 |
注意事项 | 1、切片若为石蜡切片,要在二甲苯中先脱蜡,再至无水乙醇。 |
2、0.05%碳酸锂水溶液分色应该在显微镜下进行,至背景呈灰色为止。70%酒精再次分色时,至背景无色为止。 |
其他 | 1、LFB染色完后,可用焦油紫溶液或苏木素-伊红复染,这样能更好地显示出细胞的形态。 |
2、复染之后要入正丁醇漂洗脱水,这样染色效果更佳。 |
3、溶液配制:劳克坚牢蓝1g,95%酒精100ml,10%冰醋酸0.5ml。混匀后过滤,室温保存。 |